Определение бактериальной обсемененности молока

от

Главная / Приборы для определения качества МОЛОКА и МОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ / Определение бактериальной обсемененности молока / Набор «Люмтэк» по определению КМАФАнМ в сыром молоке

Определение бактериальной обсемененности молока

Комплектация набора

Реагенты стерильные

Флакон N 1 — АТФ-реагент ЛЮМТЕК — 2 флакона.

Флакон N 2 — Раствор для растворения АТФ-реагента — 1 флакон

Флакон N 3 — АТФ-контроль — 1 флакон

Флакон N 4 — Реагент для разрушения бактериальных клеток — 1 флакон Флакон N 5 — Реагент для предобработки молока — 20 пробирок Флакон N 6 — Промывочный раствор для КМАФАнМ — 1 флакон

Одноразовые расходные материалы в составе набора (стерильные)

  • Фильтравета — 43 шт
  • Полоски фильтровального картона (комплект – 10 шт.) — 1 комплект

Расходные материалы многоразового использования, обязательные для первого заказа, но не входят в набор

  • Штатив для фильтравет
  • Шприц с резиновым наконечником

Расходные материалы и оборудование, поставляемые по заказу

  • Автоматические пипетки фиксированного объема на 0,02 мл и 0,10 мл — по 1 шт
  • Наконечники для пипеток (комплект – 50 шт) — 2 комплекта
  • Биолюминометр «ЛЮМ-1» или другой с аналогичными техническими характеристиками

ВНИМАНИЕ! Для получения воспроизводимых результатов анализа молока необходимо соблюдать меры предосторожности, принятые при работе в микробиологической лаборатории, в частности:

  • перед проведением анализа поверхность лабораторного стола обработать 70% этанолом,
  • использовать автоматические пипетки и стерильные одноразовые наконечники к ним,
  • для выполнения каждой операции использовать новый стерильный наконечник,
  • после анализа каждого образца молока штатив для фильтравет, фланцевый наконечник шприца, пинцет и автоматические пипетки обрабатывать 70% этанолом.

Проведение анализа

Подготовка раствора АТФ-реагента

  1. Во флакон № 1 внести 2 мл раствора из флакона № 2, выдержать 30 мин перед использованием. Полученный раствор АТФ-реагента можно хранить при комнатной температуре в течение рабочего дня, а при 4оС – в течение 2-3 дней.

Подготовка раствора АТФ-контроля

  1. Во флакон № 3 внести 1 мл раствора из флакона № 4, перемешать.

Измерение сигнала для раствора АТФ-контроля

  1. Поместить фильтравету с помощью пинцета в кюветное отделение люминометра. Внести в нее 0,02 мл раствора АТФ-контроля из флакона № 3 и 0,10 мл раствора АТФ-реагента из флакона № 1, быстро перемешать и измерить биолюминесцентный сигнал (I1).
  2. Повторить измерения по п. 3 еще два раза и найти среднее значение биолюминесцентного сигнала для АТФ-контроля (I1)’

Анализ пробы молока

  1. Образец отфильтрованного молока объемом 50 мл довести до комнатной температуры и тщательно перемешать.
  2. Во флакон № 5 с реагентом для предобработки молока внести 1 мл молока и тщательно перемешать. Флакон закрыть и поместить в водяную баню с температурой (45±1)оС на 10 мин.
  3. В штатив для фильтравет с помощью пинцета поместить полоску фильтровального картона и установить на него две фильтраветы.
  4. В одну фильтравету внести 0,10 мл предобработанного молока и продавить его на фильтровальный картон, создавая избыточное давление с помощью шприца с резиновым наконечником.
  5. Полоску фильтровального картона сдвинуть таким образом, чтобы под фильтраветой оказался сухой участок полоски.
  6. Внести в ту же фильтравету 3-4 капли промывочного раствора из флакона № 6 и продавить его в фильтровальную бумагу, создавая избыточное давление с помощью шприца с резиновым наконечником.
  7. Поместить фильтравету с помощью пинцета в кюветное отделение люминометра и внести 0,02 мл раствора из флакона № 4.
  8. Через 1-2 мин в ту же фильтравету добавить 0,10 мл раствора АТФ-реагента из флакона № 1, быстро перемешать и измерить максимальный биолюминесцентный сигнал (I2).
  9. Повторить операции по пп. 8-12 со второй фильтраветой. Найти среднее значение биолюминесцентного сигнала для образца молока (I2)’.
  10. Концентрацию АТФ в молоке рассчитать по формуле (1),

[АТФ]молоко=2 * (I2)’ : (I1)’ , пикомоль/мл (1),

  1. По величине концентрации АТФ в молоке ([АТФ]молоко), пользуясь таблицей, определить величину КМАФАнМ.

Таблица . Определение КМАФАнМ в сыром молоке биолюминесцентным методом по концентрации ATФ

Концентрация АТФ в молоке, пикомоль/мл КМАФАнМ в молоке, КОЕ/ мл
менее 0,6 до 50 тыс.
0,6 — 1,21 50 — 100 тыс.
1,2 — 2,7 100 — 200 тыс.
2,7 — 4,2 200 — 300 тыс.
4,2 — 7,3 300 — 500 тыс.
7,3 – 74,0 500 — 4000 тыс.
74,0 — 442 4000 — 20000 тыс.

У нас Вы можете приобрести наборы реагентов для следующих видов исследований

Экспресс-система Стандартная микробиология
Виды исследования Время исследования Время исследования
Общая бактериальная обсемененность сырого молока 15-20 мин. 72 часа
Общая бактериальная обсемененность мясного фарша 90 мин. 36 часов
Контроль соматических клеток-показатель мастита у коров 1-2 мин. 10-30 мин.
Санитарно-гигиеническая чистота поверхностей технологического оборудования 1-2 мин. 24-36 часов
Микробная чистота поверхностей 2мин.-6 часов 24-36 часов
Контроль стерильности больничных помещений и медицинского оборудования 3-6 часов до 14 дней
Микробиологический контроль питьевой воды 3-6 часов 24 часа и более
Микробиологический контроль технической (оборотной воды) 2 мин. – 3 часа 24 часа
Бактериологический контроль чистоты воздуха в помещениях 3-5 часов 24-36 часов
Оценка и подбор антибиотиков 3- 6 часов 36 часов и более